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科普干货 I 核酸提取中常见的十大错误及解决方案

浏览数量: 4     作者: 本站编辑     发布时间: 2025-04-25      来源: 本站

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确保核酸的纯度和完整性是分子生物学应用取得成功的基础然而,提取过程中充满了可能影响实验结果的潜在陷阱无论是使用手动方法还是自动化核酸提取系统,了解常见错误以及如何避免这些错误都至关重要本指南重点介绍了核酸提取中常见的十个错误,并提供了切实可行的解决方案,以确保实验取得成功

1样本原料不足或质量不佳

样本原料的质量和数量会直接影响所提取核酸的产量和完整性样本量过少会导致产量低,而降解或受污染的样本则会使提取的核酸质量受损

解决方案:在提取前仔细评估并定量样本原料,确保正确储存以防止材料降解对于某些应用,可考虑采用富集步骤来提高目标核酸的浓度

2细胞或组织裂解不充分
有效的裂解对于从细胞和组织中释放核酸至关重要裂解不充分或方法不当会显著降低核酸产量

解决方案:根据样本类型优化裂解方案,具体方法包括机械破碎(如匀浆)化学裂解(使用裂解液)或酶消化确保裂解缓冲液适合你的样本,并且孵育时间和温度已优化

3抑制剂残留
许多生物样本中含有会抑制下游酶促反应(如聚合酶链式反应,即 PCR)的物质在提取过程中如果不能完全去除这些抑制剂,可能会导致假阴性结果或定量不准确

解决方案:在提取方案中采用彻底的洗涤步骤,考虑使用能有效结合核酸同时将抑制剂洗去的离心柱或磁珠

4提取过程中核酸降解
DNA 和 RNA 容易受到样本中存在的或提取过程中引入的核酸酶的降解

解决方案:操作要迅速,并在合适的温度下进行(通常在冰上或按照方案中指定的温度)提取 RNA 时使用 RNA 酶抑制剂,并确保所有试剂和耗材都不含核酸酶,核酸提取系统内的受控环境有助于减少与潜在污染物的接触

5样本间交叉污染
将一个样本中的核酸引入到另一个样本中会导致假阳性结果,尤其是在使用如 PCR 这类高度灵敏的技术时

解决方案:严格执行无菌操作技术每一步和每个样本都使用新的移液器吸头,按照单向工作流程处理样本,从预扩增区域移至后扩增区域四亿科学仪器MultiEX 系列核酸提取仪提供封闭系统和一次性试剂盒,可显著降低交叉污染的风险

MulticEX 016 (2)

6核酸与固相的结合效率低
许多提取方法依赖于核酸与固相(如硅胶膜或磁珠)的结合,结合效率低会导致产量降低

解决方案:确保结合缓冲液组分和 pH 值正确,优化孵育时间和混合步骤,最大限度地提高核酸结合率四亿科学仪器核酸提取系统,特别是与优化后的提取试剂盒配合使用时,可确保高效且一致的结合,从而获得可靠的结果


7固相洗涤不彻底
洗涤不充分会残留污染物和结合缓冲液,这会干扰下游应用

解决方案:严格按照洗涤方案操作,使用推荐体积和类型的洗涤缓冲液在洗脱前确保完全去除洗涤缓冲液四亿科学仪器MultiEX 096P 核酸提取仪提供精确且可重复的洗涤步骤,可最大限度地减少人为误差

MultiEX 096 (2)

8核酸洗脱效率低
洗脱是将纯化后的核酸从固相上释放下来的最后一步,洗脱效率低会导致回收率降低

解决方案:使用推荐的洗脱缓冲液和体积,按照方案中指定的条件优化洗脱孵育时间和温度四亿科学仪器MultiEX 032 核酸提取仪允许自定义洗脱体积,为不同的下游应用提供了灵活性

MulticEX 032 (3)

9提取的核酸储存不当
提取后的核酸需要正确储存以保持其完整性,储存不当会导致核酸降解

解决方案:将 DNA 储存在 - 20°C 或 - 80°C 的合适储存缓冲液中,RNA 更不稳定,通常需要储存在 - 80°C避免反复冻融

10缺乏质量控制
在进行下游应用之前,如果不评估提取的核酸的质量和数量,可能会在质量不佳的样本上浪费时间和资源

解决方案:始终使用分光光度计或荧光计对提取的 DNA 或 RNA 进行定量使用凝胶电泳或生物分析仪评估核酸的完整性四亿科学仪器 MultiEX 系列核酸提取仪的稳定可靠性能有助于获得更多可预测且高质量的核酸,从而简化下游的质量控制流程



通过了解并避免这些常见错误,研究人员可以显著提高核酸提取过程的成功率和可靠性


四亿科学仪器有限公司的核酸提取系统如何提供帮助

为应对这些挑战,四亿科学仪器有限公司提供了一系列核酸提取系统,旨在简化和规范提取过程:


组合


  • MultiEX 016:非常适合中小通量的应用,可实现高效提取,且操作时间短

  • MultiEX 032:这是一款多功能系统,针对中等通量的实验室进行了优化,在确保高质量提取的同时保持灵活性

  • MultiEX 024L:专为大体积核酸提取而设计,特别适用于需要较高样本输入量的应用

  • MultiEX 096P:非常适合高通量实验室,能够同时处理多达 96 个样本,从而提高效率和通量




四亿科学仪器可靠的核酸提取系统可以进一步简化提取过程,减少人为误差,并确保为你的关键实验提供高质量的核酸产量



关于我们


广州国睿科学仪器有限公司作为2009年成立的国睿集团旗下的子公司,专注于为全球实验室提供高质量的实验仪器及用品,积极推动科学领域的研究发展如今,我们已成为世界上发展最快的实验室仪器制造商之一

公司实力强劲,荣获“国家级专精特新小巨人企业”荣誉称号,做为牵头单位获批国家重大专项,并设立了博士后科研工作站分站公司的移液系列和搅拌器系列产品荣获省内名优高新技术产品认证国睿科仪始终秉持 “创新品质诚信” 的价值观,以“打造质量最优的实验室仪器”为企业发展目标,竭诚为客户提供高性价比的产品和优质贴心的服

国睿科仪旗下四亿科学仪器品牌,产品极具性价比优势,畅销全球 70 多个国家在发展进程中,四亿科学仪器紧密贴合市场需求的动态变化,依托专业高效的研发团队世界顶尖的制造能力以及严苛的质量管理体系,坚定不移地走科技创新和自主品牌发展之路在 “以客户为中心” 的企业文化的指引下,不断为客户创造更多价值,赢得了全球众多品牌的认可与信赖,成为其首选的 OEM/ODM 合作伙伴

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